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凈信高壓均質(zhì)機助力昆蟲細胞蛋白研究

昆蟲蛋白研究在當今社會是比較普遍的。 相比于大腸桿菌,昆蟲細胞能完成更復雜的蛋白翻譯后修飾,表達出更接近天然構象的功能性蛋白。

但是蛋白表達過程是復雜的,每一步都至關重要,尤其在蛋白提取實驗上,選對方法很重要。

下面一起看看昆蟲蛋白提取的方法:



實驗步驟

1.樣品準備:收獲經(jīng)離心濃縮的昆蟲細胞沉淀,用預冷的裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑)量懸,制成均勻的細胞懸液。

2.儀器準備與參數(shù)設置:將凈信高壓均質(zhì)機連接已經(jīng)預冷的冷水機(需要提前半小時預冷)以維持低溫環(huán)境。將細胞懸液加入料杯。設定破碎壓力(例如400 bar)和循環(huán)次數(shù)(通常1-3次)。

3.細胞均質(zhì)完成后,及時收集樣品,放置在冰箱里,

4.后處理與分析:通過SDS-PAGE、Western BlotELISA或活性測定等方法,對目標蛋白生物活性進行綜合分析。

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