產(chǎn)品詳情
Celetrix電轉(zhuǎn)儀（細(xì)胞電穿孔儀）
1500A-EX電轉(zhuǎn)儀，最大轉(zhuǎn)染體積1000uL.
電轉(zhuǎn)染，最關(guān)心的是什么？
1.轉(zhuǎn)染效率
2.細(xì)胞死亡率
對(duì)一批同樣的細(xì)胞，性質(zhì)相似，為什么有的細(xì)胞順利轉(zhuǎn)入了 DNA, 有的細(xì)胞沒有得到DNA.，有的細(xì)胞電轉(zhuǎn)后活的好好的，有的就被‘電死’了。
從電轉(zhuǎn)儀的角度來(lái)講，
如果電轉(zhuǎn)染時(shí)候每個(gè)細(xì)胞受到的電壓相同，電擊時(shí)間相同，毫無(wú)疑問，通過(guò)調(diào)節(jié)電擊電壓，電擊時(shí)間，可以得到一個(gè)較高的轉(zhuǎn)染效率和較低的細(xì)胞死亡率。
問題是，傳統(tǒng)的電擊杯，宏觀上可以控制電轉(zhuǎn)儀每次電擊時(shí)間和電壓相同，但微觀上，電擊杯里面不同位置的細(xì)胞分到的電壓相同嗎。
答案是否定的。且將電擊杯里的小世界放大了分析。
1.電擊杯液面部分
電極杯內(nèi)由于液體表面張力的作用，液面不平，導(dǎo)致對(duì)液體內(nèi)部電壓分配的均勻度有很大的影響。電壓分配可以用一個(gè)簡(jiǎn)化的等效電路來(lái)說(shuō)明。電極杯內(nèi)液體可以分割成相同的部分，每個(gè)部分電阻相同多路先串聯(lián)再并聯(lián)，每一路兩端總電壓相等。
液面翹角處，相當(dāng)于電阻先并聯(lián)后再串聯(lián)入電路，此處阻值變小，在電路中分壓變?。ㄈ缬覉D ），細(xì)胞電壓不夠不能電轉(zhuǎn)。由于兩端總電壓相同，多出來(lái)的電壓分到液體凹面下方的區(qū)間，導(dǎo)致此處電壓過(guò)高（如右圖），細(xì)胞死亡。
結(jié)論：電極杯里靠近液面的部分細(xì)胞分配到的電壓相差較大。
2.靠近電極部分
電極杯中樣品與電極接觸面積大，電化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生毒性物質(zhì)多，并且產(chǎn)生非常多的氣泡。氣泡對(duì)電轉(zhuǎn)的實(shí)際影響非常大。
由于氣泡是絕緣體，電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過(guò)，這樣導(dǎo)致氣泡間隙的溶液中電流富集升高，處于其中的細(xì)胞因承受太高的電壓而死亡。氣泡作為一個(gè)球形絕緣體，可以扭曲周圍電流的走向。氣泡側(cè)面（氣泡間隙溶液）電流變大，而氣泡的前后兩方都是低電流區(qū)，處于此區(qū)的細(xì)胞得到電壓不夠，不能電轉(zhuǎn)。見右圖。
小結(jié)：
電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應(yīng) 影響，電場(chǎng)不均勻?？拷鼉蓚€(gè)電極1-2mm的區(qū)域由于氣泡的作用，電場(chǎng)也不均勻。電極杯內(nèi)電場(chǎng)比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很?。ㄓ覉D藍(lán)色部分），而1mm或者2mm電極杯甚至可能沒有較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域。
Celetrix電轉(zhuǎn)儀如何避免以上問題
1.Celetrix工作時(shí)電轉(zhuǎn)管時(shí)密閉的，充滿了電轉(zhuǎn)液和電轉(zhuǎn)樣品，沒有液面效應(yīng)
2.Celetrix工作時(shí)電轉(zhuǎn)管是加壓的，產(chǎn)生的氣體被壓縮溶于液體，而且相比于電擊杯，Celetrix工作時(shí)電轉(zhuǎn)管與液體接觸面積很小。幾乎避免了氣泡效應(yīng)。
再加上Celetrix電轉(zhuǎn)儀本身獨(dú)特的設(shè)計(jì)（已經(jīng)獲得中國(guó)，美國(guó)，歐盟，日本等國(guó)家和地區(qū)的專利）。
Celetrix 電轉(zhuǎn)儀一次可以電轉(zhuǎn)從20uL到200uL不等的樣品，適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需要。
Celetrix積累了多種血細(xì)胞，纖維細(xì)胞，上皮細(xì)胞，腎細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞等電轉(zhuǎn)難易程度不一的各類細(xì)胞的優(yōu)化電轉(zhuǎn)參數(shù)，用戶只需根據(jù)我們的參數(shù)稍作實(shí)驗(yàn)便可得到適合自己的參數(shù)。對(duì)于罕見的細(xì)胞類型，Celetrix實(shí)驗(yàn)室可以協(xié)助用戶獲取最優(yōu)電轉(zhuǎn)參數(shù)。
Celetrix可以承諾同一實(shí)驗(yàn)室的同一類細(xì)胞，可以做到同類產(chǎn)品中轉(zhuǎn)染率最高，細(xì)胞死亡率最低。
公司在上海備有樣機(jī)。
電轉(zhuǎn)舉例
1.T細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染
傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法對(duì)于T細(xì)胞非常困難，特別是對(duì)于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染。
Celetrix新一代電轉(zhuǎn)技術(shù)可以高效轉(zhuǎn)染從新鮮PBMC到刺激培養(yǎng)階段的T細(xì)胞。與其他電轉(zhuǎn)技術(shù)相比，Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)具有最高的效率。同時(shí)，我們的技術(shù)也具有最高的細(xì)胞存活率，使得CAR-T，TCR-T制備、CRISPR介導(dǎo)的基因下調(diào)等變得容易。
所示圖片攝自長(zhǎng)期培養(yǎng)的電轉(zhuǎn)后T細(xì)胞。T細(xì)胞在電轉(zhuǎn)后可以聚集生長(zhǎng)，并且GFP表達(dá)可以維持很長(zhǎng)時(shí)間。
2.Ipsc干細(xì)胞高效電轉(zhuǎn)
人類的iPSC電轉(zhuǎn)比較困難，一是達(dá)到高效率不容易，二是維持iPSC的未分化狀態(tài)不容易。
Celetrix新一代電轉(zhuǎn)技術(shù)可以用于電轉(zhuǎn)人的iPSC，比如ACS-1030（ATCC）。電轉(zhuǎn)效率保守估計(jì)可以達(dá)到73%以上，同時(shí)細(xì)胞存活率非常高，大部分細(xì)胞都存活很好。
ACS-1030 transfection with GFP plasmid after 24 hours
survival>85%
GFP%>73.7%
24h
電轉(zhuǎn)3天后，iPSC已經(jīng)自發(fā)形成團(tuán)塊生長(zhǎng)的典型未分化狀態(tài)，與未電轉(zhuǎn)的細(xì)胞看不出區(qū)別。同時(shí)，使用Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)，營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞層也不是必須的，給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)了極大的方便。
72h
3.mRNA超高效電轉(zhuǎn)
有一些實(shí)驗(yàn)方法需要轉(zhuǎn)染mRNA。Celetrix新一代電轉(zhuǎn)技術(shù)也可以電轉(zhuǎn)mRNA。
mRNA電轉(zhuǎn)的效率一般比質(zhì)粒高。比如GFP的mRNA電轉(zhuǎn)到Jurkat可以達(dá)到97.5%的超高效率。
mRNA表達(dá)的均勻度比質(zhì)粒要高，總體來(lái)說(shuō)mRNA表達(dá)的蛋白在各個(gè)細(xì)胞中比較均衡。
mRNA的蛋白表達(dá)量一般不如強(qiáng)表達(dá)的質(zhì)粒，因此要達(dá)到較高的表達(dá)水平以及較長(zhǎng)的表達(dá)持續(xù)時(shí)間，使用Celetrix的電轉(zhuǎn)技術(shù)就非常有必要。
siRNA電轉(zhuǎn)比mRNA更加容易。一般來(lái)說(shuō)siRNA電轉(zhuǎn)本身可以達(dá)到接近100%的效率，但是蛋白水平的下調(diào)是由siRNA的性質(zhì)決定的。
